Bacillus subtilis aptikimo bandymo metodai
B. subtilis
Bacillus subtilisyra dažnas mikroorganizmas, kuris dažnai naudojamas pašarų pramonėje, būtent jo gamyboje, taip pat kaip priedas po gamybos. Jo aptikimas yra labai svarbus siekiant užtikrinti pašarų kokybę ir saugą. Toliau bus pateikta išsami įvadas į įvairius aptikimo metodus, sąlygas ir bandymų standartusBacillus subtilispašaruose. Kiekvienas metodas turi savų privalumų ir trūkumų, todėl vartotojas turi atsižvelgti į konkrečią situaciją ir taikymo scenarijų.
Tradicinis auginimo būdas
Mėginio apdorojimas: pasverkite tam tikrą mėginio kiekį, įpilkite skiediklio maišymui ir ultragarsiniam apdorojimui, kad užtikrintumėte, jogBacillus subtilis.
Skiedimas: Gradientu praskieskite apdorotą mėginį, kad užtikrintumėte, jog kiekvienas mėginio praskiedimas gali būti tolygiai padengtas auginimo terpėje.
Inokuliacija: uždėkite atskiestą mėginį ant maistinės agaro plokštelės, pažymėkite analizės numerį, datą ir praskiedimo lygį.
Auginimas: Inokuliuotas plokšteles 16-20 valandų dėkite į 37 ℃ pastovios temperatūros inkubatorių ir stebėkite bakterijų kolonijų augimą.
Kolonijų charakteristikų stebėjimas: kolonijosBacillus subtiliskietoje auginimo terpėje paprastai būna šiurkščios ir netaisyklingos formos su didesnėmis pieno baltumo iki pilkšvai baltomis kolonijomis.
Biocheminis identifikavimas: atlikdami daugybę biocheminių testų, tokių kaip oksidazės testas, katalizinio fermento testas, želatinos suskystinimo testas ir nitratų redukcijos testas, toliau patvirtinkite, ar išskirtos bakterijos yraBacillus subtilis.
Molekulinės biologijos metodas
PGR aptikimas: buvimasBacillus subtilisaptinkamas amplifikuojant specifinę genų seką polimerazės grandininės reakcijos (PGR) būdu. Šis metodas pasižymi dideliu jautrumu ir stipriu specifiškumu, tačiau reikalauja brangios įrangos ir profesionalių žinių.
Fluorescencinė kiekybinė PGR (qPCR): kiekybiškai aptinkama, ar nėraBacillus subtilisamplifikuojant specifines genų sekas, turinčias didelį jautrumą ir specifiškumą, bet ir reikalaujančios profesionalios įrangos bei veiklos žinių.
Imunologiniai metodai
Su fermentais susijęs imunosorbento tyrimas (ELISA): jis netiesiogiai atspindi turinįBacillus subtilisspecifinius antikūnus mėginyje, nustatant jų jungimosi reakciją su antigenais. Šis metodas yra labai jautrus, tačiau jį gali paveikti reagentų kokybė ir eksperimentinės procedūros.
Imunomagnetinių karoliukų metodas: naudojant imunomagnetinius karoliukus specialiai užfiksuotiBacillus subtilisir tada atlikite aptikimą. Šis metodas taip pat pasižymi dideliu jautrumu ir specifiškumu, tačiau operacija yra sudėtingesnė.
