Celiulazės padermės jonas ir aktyvumas
Štamo pasirinkimas Celiuliazė
Štamų parinkimas yra esminis darbasCeliuliazėgamyba, ir daugelis ekspertų šalyje ir užsienyje atliko išsamius tyrimus. Siekiant pagaminti aukštos kokybėsCeliuliazėWang Jialin ir kt. (1996), remdamiesi vietine ir užsienio patirtimi, nuosekliai pristatė Trichoderma viride 10, Trichoderma viride Sn-91014, Aspergillus niger NT-15 ir Aspergillus niger XX-15A. Remiantis tuo, buvo panaudoti fizikiniai ir cheminiai mutagenezės metodai, tokie kaip ultravioletinė spinduliuotė, specifinė elektromagnetinių bangų spinduliuotė, linijinis greitintuvas ir nitrozoguanidinas, siekiant gauti didelio derlingumo NT15-H, NT15-H1, XT-15H ir XT-15H1 padermes. Trichoderma NT-15H kietosios kultūros aktyvumą išbandė Lengvosios pramonės ministerijos Maisto kokybės priežiūros ir bandymų centras Nandzingo stotyje, o filtro popieriaus aktyvumas buvo 3670 u/g.Celiuliazė C1 fermento aktyvumas buvo 24460 u/g, irCeliuliazė Cx fermento aktyvumas buvo 1800 u/g, o tai pasiekė tarptautinį pažangų lygį. Ši padermė pasižymi stabiliais rezultatais gamyklinėje gamyboje. Zhang Linghua ir kt. (1998) naudojo Trichoderma harzianum W-925, J-931 ir gavo Wu-932.Celiuliazė padermė, pasižyminti dideliu fermentiniu aktyvumu po sudėtinės mutagenezės su 2 % dietilsulfatu ir ultravioletine spinduliuote (15 W, 30 cm, 2 min.).Celiuliazė padermės CMC sacharifikacijos galia buvo 2975, o filtrinio popieriaus fermentų aktyvumas – 531, tai yra atitinkamai 100 % ir 81 % daugiau nei pradinės padermės W-925. Wang Chengshu ir kt. (1997) iš Chemijos pramonės ministerijos Pašarų priedų technologijų aptarnavimo centro panaudojo centro Trichoderma reesei A3 UV ir nitrozoguanidino junginių mutagenezei atlikti. Apdorotos sporos buvo inokuliuojamos ant pluošto dvisluoksnės plokštelės, kultivuojamos 30 °C temperatūroje 5–8 dienas ir paliekamos 15 °C temperatūroje 7–10 dienų. Pavienės kolonijos, turinčios didesnį skaidraus apskritimo skersmenį ir kolonijos skersmenį, buvo atrinktos kietosios fazės fermentacijai trikampėje kolboje, o po to patikrintos, siekiant gauti Trichoderma reesei 91-3 padermę, pasižyminčią dideliu...Celiuliazėveikla.
TheCeliuliazėpadermės yra linkusios skaidytis, o jų fermentų gamybos pajėgumas po skaidymo žymiai sumažėja. Tam gali būti trys priežastys:
①Mutagenezės būdu atrinkta padermė patiria grįžtamąją mutaciją.
②Natūrali neigiama mutacija.
③Ilgalaikis bakterijų padermių laikymas žemoje temperatūroje gali lemti antrinių hifų augimą ant konidijų, o antrinių hifų suformuotų konidijų gyvybingumas yra silpnas, o tai gali būti pagrindinė bakterijų degradacijos priežastis. Siekiant išvengti degradacijosCeliuliazėZhang Linghua ir kt. (1998) pranešė apie smėlio mėgintuvėlių naudojimą padermėms konservuoti. Smėlis ir dirvožemis, kurie ruošiami sijoti ir valyti, sumaišomi santykiu 3:2 ir supakuojami į mėgintuvėlius. Jie tris kartus sterilizuojami 1 kg/cm2 slėgiu 30 minučių. Iš konservuotinos bakterijų padermės paruošiama 1000 ml sporų suspensija. Į kiekvieną smėlio mėgintuvėlį įšvirkščiama 0,5 ml, gerai suplakama ir laikoma vakuuminėje džiovyklėje, kurioje yra bevandenio CaCl2. Po bandymoCeliuliazė fermentų aktyvumas iš esmės nepakito per 121 testavimo dieną; laikas, skirtasCeliuliazė Fermentų aktyvumo sumažėjimas 50 % buvo pailgintas nuo 60 dienų naudojant įprastinius metodus iki 160 dienų, o tai žymiai sulėtino bakterijų skaidymo greitį.
Veiksniai, darantys įtakąCeliuliazėveikla
Optimalus pHCeliuliazėpaprastai yra nuo 4,5 iki 6,5. Gliukonolaktonas gali veiksmingai slopintiCeliuliazė, ir sunkiųjų metalų jonai, tokie kaip vario ir gyvsidabrio jonai, taip pat gali slopintiCeliuliazėTačiau cisteinas gali pašalinti jų slopinamąjį poveikį ir dar labiau jį suaktyvinti.CeliuliazėAugalų audiniuose yra natūraliųCeliuliazėinhibitoriai; Jis gali apsaugoti augalus nuo pelėsių sukelto puvimo, ir šie inhibitoriai yra fenolio junginiai. Jei augalų audiniuose yra didelis oksidazės aktyvumas, jis gali oksiduoti fenolio junginius į chinono junginius, kurie gali slopintiCeliuliazė.
